技術(shù)文章
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細(xì)胞外泌體作為一種新型的生物分子,近年來(lái)備受科學(xué)家們的關(guān)注。它是一種由細(xì)胞釋放出來(lái)的小顆粒,直徑在30-100nm之間,可以通過(guò)分泌到細(xì)胞外提供多種生物學(xué)功能。目前關(guān)于細(xì)胞外泌體研究取得了一系列進(jìn)展,本文將就此進(jìn)行詳細(xì)介紹。一、概述細(xì)胞外泌體是由細(xì)胞內(nèi)部通過(guò)分泌方式釋放到細(xì)胞外的一類小顆粒,其大小在30-100nm之間,由脂質(zhì)雙層包裹形成。細(xì)胞外泌體中含有許多重要的生物分子,如DNA、RNA、蛋白質(zhì)、代謝產(chǎn)物等,能夠在細(xì)胞間傳遞信號(hào)和調(diào)節(jié)基因表達(dá)等生物學(xué)過(guò)程。二、來(lái)源及分類細(xì)...
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細(xì)胞培養(yǎng)是一種重要的生物學(xué)技術(shù),可以使研究人員在體外繁殖和研究細(xì)胞,已經(jīng)廣泛應(yīng)用于醫(yī)學(xué)、生物學(xué)、農(nóng)業(yè)、食品工業(yè)等領(lǐng)域,成為現(xiàn)代生命科學(xué)的重要組成部分。細(xì)胞培養(yǎng)是將細(xì)胞放入一定的培養(yǎng)基中,提供適宜的培養(yǎng)環(huán)境,使其在體外繁殖和生長(zhǎng)?;驹硎窃谝欢ǖ呐囵B(yǎng)基中提供足夠的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和適宜的生長(zhǎng)條件,如溫度、濕度、氧氣、二氧化碳等,使細(xì)胞能夠不斷繁殖和生長(zhǎng)。隨著技術(shù)的不斷發(fā)展,現(xiàn)在已經(jīng)可以培養(yǎng)各種類型的細(xì)胞,包括哺乳動(dòng)物細(xì)胞、微生物細(xì)胞、植物細(xì)胞等。細(xì)胞培養(yǎng)需要提供適宜的培養(yǎng)條件,如溫度...
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一些細(xì)胞和組織可在懸浮狀態(tài)下生長(zhǎng),但相當(dāng)一部分哺乳動(dòng)物細(xì)胞需要表面貼壁。因此,用于提供細(xì)胞體外培養(yǎng)環(huán)境的培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)板和培養(yǎng)皿除了具有良好的透明度和無(wú)毒、無(wú)菌外,還需經(jīng)表面改性處理使之能夠貼壁、分裂和生長(zhǎng)。細(xì)胞培養(yǎng)瓶瓶體設(shè)計(jì)合理,表面TC處理,適用于實(shí)驗(yàn)室中等規(guī)模細(xì)胞和組織培養(yǎng)。細(xì)胞培養(yǎng)瓶是實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行長(zhǎng)時(shí)間細(xì)胞培養(yǎng)、大量細(xì)胞擴(kuò)增和防污染的合適培養(yǎng)器皿。未處理表面適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng);TC處理表面,經(jīng)過(guò)處理后聚苯乙烯表面具有較好親水性,適用于常見(jiàn)細(xì)胞系的粘附和伸展;超親水處理表面...
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凋亡(Apoptosis),或者說(shuō)程序性細(xì)胞死亡(Programmedcelldeath),是細(xì)胞內(nèi)建的防御機(jī)制之一,在生物的正常發(fā)育及疾病抵御中起到重要的作用。凋亡過(guò)程與通路的異常,會(huì)導(dǎo)致多種疾病,包括腫瘤。目前至少有十?dāng)?shù)種檢測(cè)細(xì)胞凋亡的方法,從大框架上講,可以劃分為基于細(xì)胞形態(tài)、生物學(xué)功能和生化標(biāo)記三大類。然而,每一種方法都有其優(yōu)缺點(diǎn),且并非所有的方法對(duì)每一位實(shí)驗(yàn)人員來(lái)說(shuō)都是實(shí)用的。細(xì)胞凋亡(Apoptosis)是細(xì)胞程序性死亡(Programmedcelldeath)的...
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原代培養(yǎng)的細(xì)胞,來(lái)源于胚胎、組織器官和外周血,通過(guò)特殊的分離方法制備,稱為原代細(xì)胞。初步分離得到的細(xì)胞具有與體內(nèi)細(xì)胞相似的生物學(xué)特性,是研究生進(jìn)行與物體相關(guān)的生命活動(dòng)的理想材料。原代細(xì)胞分離培養(yǎng)是從體內(nèi)取出人/小鼠模型動(dòng)物特異性細(xì)胞,用胰蛋白酶和螯合劑(EDTA)處理,分散成單細(xì)胞,并在合適的培養(yǎng)基中培養(yǎng),使得細(xì)胞能夠存活、生長(zhǎng)和繁殖的過(guò)程。原代培養(yǎng)是指細(xì)胞、組織和器官直接從體內(nèi)取出后立即進(jìn)行培養(yǎng)。此時(shí)的細(xì)胞保持了原細(xì)胞的基本性質(zhì),如果是正常細(xì)胞,則仍保留二倍體數(shù)。但實(shí)際上,...
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成纖維細(xì)胞比心肌細(xì)胞更容易貼壁,具有分裂增殖能力。差異貼壁后,原代心肌細(xì)胞間中仍有少數(shù)成纖維細(xì)胞混雜,如果處理不當(dāng),很容易長(zhǎng)成優(yōu)勢(shì)細(xì)胞。溴脫氧尿苷(BrdU)可以干擾細(xì)胞有絲分裂,因此BrdU常規(guī)用于抑制成纖維細(xì)胞的生長(zhǎng)。但如果用胎牛血清培養(yǎng)細(xì)胞,由于胎牛血清含有很多促有絲分裂因子,BrdU很難抑制成纖維細(xì)胞的生長(zhǎng)。使用小牛血清可以克服這種現(xiàn)象,獲得90%以上的心肌細(xì)胞。觀察原代心肌細(xì)胞間形態(tài)時(shí),接種密度低,貼壁心肌細(xì)胞數(shù)量減少。為了防止存活的心肌細(xì)胞隨著液體的更換而被丟棄,...
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細(xì)胞外泌體是細(xì)胞分泌的大小約為30-150nm的納米物質(zhì),是細(xì)胞外囊泡的一類,結(jié)構(gòu)類似于細(xì)胞,磷脂雙分子層表面具有多種特異性膜蛋白,內(nèi)部搭載著多種蛋白質(zhì)、RNA、DNA等重要生物信號(hào)物質(zhì),廣泛分布于血液、尿液、腦脊液、唾液、乳汁、膽汁等各種體液中。外泌體的來(lái)源細(xì)胞種類非常豐富,幾乎在人體血液、尿液、母乳和唾液等多種體液中都能發(fā)現(xiàn)它的蹤跡??蓚鬟f包括DNA、RNA、miRNA、脂質(zhì)和蛋白質(zhì)在內(nèi)的多種生物活性物質(zhì),同時(shí)保護(hù)包裹的內(nèi)含物免受核酸酶和蛋白酶,以及外界壞境變化引起的降解...
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CellCountingKit-8(簡(jiǎn)稱CCK-8)試劑可用于簡(jiǎn)便而準(zhǔn)確的細(xì)胞增殖和毒性分析。CCK-8&MTT方法比較方法優(yōu)點(diǎn)缺點(diǎn)CCK-8法靈敏度高、不使用有機(jī)溶劑、檢測(cè)迅速、重復(fù)性好價(jià)格較MTT貴、CCK8試劑的顏色為淡紅色、與含酚紅的培養(yǎng)基顏色接近,容易漏加或多加MTT法價(jià)格便宜操作步驟較多,需要使用有機(jī)試劑,靈敏度不如CCK-8,多數(shù)需要配制,檢測(cè)時(shí)間長(zhǎng),細(xì)胞毒性較高一、原理:CCK-8是MTT的升級(jí)產(chǎn)品,其基本原理為:該試劑中含有WST-8【化學(xué)名:2-(2-甲氧...
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