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細(xì)胞株的標(biāo)記是一種經(jīng)過特定操作使細(xì)胞株獲得可視性或可檢測性的方法。這種標(biāo)記技術(shù)可以提高實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)確性和數(shù)據(jù)分析的可靠性,進(jìn)而推動(dòng)科學(xué)研究的進(jìn)步。本文將詳細(xì)介紹標(biāo)記細(xì)胞株的方法及其在生命科學(xué)研究中的應(yīng)用。一、細(xì)胞株的標(biāo)記方法1、熒光標(biāo)記法熒光標(biāo)記法是目前應(yīng)用最為廣泛的標(biāo)記方法之一。這種方法利用熒光染料或熒光蛋白對細(xì)胞進(jìn)行標(biāo)記,從而使細(xì)胞在顯微鏡下呈現(xiàn)出特定的熒光信號。熒光標(biāo)記法無需破壞細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu),標(biāo)記后的細(xì)胞仍可正常進(jìn)行代謝活動(dòng),不會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。2、放射性標(biāo)記法放射性標(biāo)...
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充質(zhì)干細(xì)胞是一類最早被發(fā)現(xiàn)的多能干細(xì)胞,具有自我復(fù)制和分化成骨、軟骨、脂肪等組織的能力。干細(xì)胞廣泛分布于人體各種組織中,如骨髓、脂肪、血液、皮膚、肌肉等,其優(yōu)異的生物學(xué)特性使得其成為醫(yī)學(xué)研究領(lǐng)域的熱點(diǎn)之一。這是由胚胎發(fā)育過程中間胚層形成的一類多能干細(xì)胞,同時(shí)也存在于成體組織中。在骨髓中,干細(xì)胞占骨髓細(xì)胞總數(shù)的1%至2%左右。它們具有自我復(fù)制和分化成多種不同類型的細(xì)胞的能力,因此被認(rèn)為是治療許多疾病的潛在治療手段。近年來,隨著對干細(xì)胞生物學(xué)特性的不斷深入研究,其臨床應(yīng)用前景也越...
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原代細(xì)胞分離培養(yǎng)是指通過體細(xì)胞分離,分離出一組同質(zhì)性的細(xì)胞群體,并在合適的營養(yǎng)液和環(huán)境條件下,使其在體外繁殖生長的過程。這種細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)被廣泛應(yīng)用于生物學(xué)、醫(yī)學(xué)、細(xì)胞和遺傳工程等領(lǐng)域,是現(xiàn)代生物技術(shù)的基礎(chǔ)。原代細(xì)胞分離培養(yǎng)的過程較為復(fù)雜,首先需要獲得生物組織的細(xì)胞,對于不同來源的細(xì)胞,其分離技術(shù)也不盡相同。例如,從動(dòng)物組織中獲取細(xì)胞,可以采用膠原酶切割的方法,以便使細(xì)胞更容易分離。而從植物體中取得細(xì)胞,則需要去除胚乳和子葉,然后通過針管分離的方法,將細(xì)胞挑選出來。每一種分離方...
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胎牛血清FBS用作真核細(xì)胞體外細(xì)胞培養(yǎng)的生長補(bǔ)充劑。動(dòng)物血清(牛血清和其它動(dòng)物血清)都用于細(xì)胞培養(yǎng),其中使用廣泛的是胎牛血清(FBS)。FBS含有生長因子和極低水平的抗體,因此在許多不同的細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)用中具有多功能性。在FBS中發(fā)現(xiàn)了1000多種成分,包括蛋白質(zhì),電解質(zhì),脂質(zhì),碳水化合物,激素,酶和其他不確定的成分,這些成分在許多培養(yǎng)條件下對于支持細(xì)胞生長都是必需的。與其它類型血清相比,胚胎期動(dòng)物血清含有更多的生長因子,及較少的gamma球蛋白含量。此外,跟新生動(dòng)物血清和成體動(dòng)...
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細(xì)胞是組成機(jī)體結(jié)構(gòu)和功能的基本單位,所以細(xì)胞的功能是生理學(xué)中一項(xiàng)重要的研究內(nèi)容。細(xì)胞膜也稱質(zhì)膜,主要由脂質(zhì)和蛋白質(zhì)組成,還有少量糖類物質(zhì)。一般而言,功能活躍的細(xì)胞,膜蛋白含量較高;而在功能簡單的細(xì)胞,則膜蛋白含量較低。目前以液態(tài)鑲嵌模型學(xué)說為主。細(xì)胞功能研究都研究些什么?細(xì)胞的基本功能:1、細(xì)胞膜的物質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)功能:2、細(xì)胞的電活動(dòng):包括兩大類:靜息電位和動(dòng)作電位。(1)靜息電位:安靜時(shí)細(xì)胞膜兩側(cè)處于外正內(nèi)負(fù)的狀態(tài)稱為靜息電位,又稱為極化。產(chǎn)生原因:鈉泵的生電效應(yīng)使膜內(nèi)負(fù)值增大,...
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細(xì)胞凋亡(apoptosis)是一種在多細(xì)胞生物體中發(fā)生的程序性細(xì)胞死亡形式,屬于細(xì)胞的正常生理過程,在生物體進(jìn)化、內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定以及發(fā)育過程中起著重要作用,具有重要生物學(xué)意義及復(fù)雜的分子生物學(xué)機(jī)制。在生物學(xué)研究過程中常常需要檢測細(xì)胞凋亡情況。目前至少有十?dāng)?shù)種檢測細(xì)胞凋亡的方法,大致可分為基于細(xì)胞形態(tài)、生物學(xué)功能和生化標(biāo)記三大類。每一方法都有其優(yōu)缺點(diǎn),需要根據(jù)實(shí)際情況選擇適合的細(xì)胞凋亡檢測方法。1、電子顯微鏡檢測方法在透射電鏡下,凋亡細(xì)胞體積變小。凋亡Ⅰ期(pro-apopto...
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充質(zhì)干細(xì)胞是組織的建造者和功能維持者:在組織形態(tài)發(fā)生中負(fù)責(zé)搭建腳手架,分化出骨骼、軟骨、脂肪、纖維等結(jié)締組織,構(gòu)成器官發(fā)育框架結(jié)構(gòu);而且,間充質(zhì)干細(xì)胞可以分泌數(shù)十種因子,為各種分化細(xì)胞提供所需營養(yǎng)。其基本特性包括:1、強(qiáng)大的增殖能力和多向分化潛能:在適宜的體內(nèi)或體外環(huán)境下分化為成骨細(xì)胞、軟骨細(xì)胞、脂肪細(xì)胞、肌細(xì)胞、神經(jīng)細(xì)胞、肝細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、基質(zhì)細(xì)胞等多種細(xì)胞的能力。2、免疫調(diào)節(jié)功能:通過細(xì)胞間的相互作用及產(chǎn)生細(xì)胞因子干擾樹突狀細(xì)胞功能并抑制T細(xì)胞的增殖及其免疫反應(yīng),從而發(fā)揮...
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耐藥細(xì)胞株一般采用體外低濃度遞增梯度結(jié)合大劑量間歇沖擊的方法,誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞對特定藥物產(chǎn)生耐藥性,從而建立相應(yīng)的耐藥細(xì)胞系。細(xì)胞株的服務(wù)內(nèi)容包括哪些?1、在體外,低濃度梯度遞增結(jié)合大劑量間歇沖擊誘導(dǎo)細(xì)胞產(chǎn)生耐藥性。2、藥物對親代細(xì)胞和耐藥細(xì)胞的IC50用2。MTT法,計(jì)算耐藥指數(shù)。目前已知的體外建立耐藥細(xì)胞株的方法有幾種:高劑量藥物沖擊法、提高藥物濃度法、提高藥物濃度與高劑量藥物沖擊相結(jié)合法、轉(zhuǎn)基因藥物篩選法。其中,常用增加藥物濃度法和大劑量藥物沖擊法建立腫瘤細(xì)胞化療耐藥模型。...
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