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細(xì)胞株通過選擇法或克隆形成法從原代培養(yǎng)物或細(xì)胞系中獲得具有特殊性質(zhì)或標(biāo)志物的培養(yǎng)物稱為細(xì)胞株,是用單細(xì)胞分離培養(yǎng)或通過篩選的方法,由單細(xì)胞增殖形成的細(xì)胞群。細(xì)胞株的特殊性質(zhì)或標(biāo)志必須在整個(gè)培養(yǎng)期間始終存在。特殊性質(zhì)或標(biāo)志必須在整個(gè)培養(yǎng)期間始終存在。對(duì)于人類腫瘤細(xì)胞,在體外培養(yǎng)半年以上,生長穩(wěn)定,并連續(xù)傳代的即可稱為連續(xù)性株或系。細(xì)胞株的建立實(shí)驗(yàn)是通過細(xì)胞與低劑量的藥物長期接觸,引起細(xì)胞本身生物化學(xué)過程的改變,細(xì)胞膜上出現(xiàn)Pgp(或P-170)糖蛋白,使細(xì)胞逐漸對(duì)藥物耐受。工具...
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標(biāo)記細(xì)胞株是細(xì)胞系中特定標(biāo)簽(Luc、GFP、RFP等)的穩(wěn)定轉(zhuǎn)移,該細(xì)胞系可用作示蹤細(xì)胞,為細(xì)胞成像和體內(nèi)成像提供了很大的便利。標(biāo)記細(xì)胞株的分離和培養(yǎng):1、在無菌條件下,取出1-3DSD大鼠的心房組織,然后用PBS清洗組織塊兩次,然后將組織切成1mm3左右;2、在組織塊中加入4ml酶消化液(0.1%胰蛋白酶和0.1%Ⅰ型膠原酶),懸停10s,37℃消化10min,然后用滴定管吹成單細(xì)胞懸液,自然沉淀收集取上清,用10%fbs培養(yǎng)基消化終止后置于4℃;3、剩余組織加入3~4m...
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凋亡或者說程序性細(xì)胞死亡,是細(xì)胞內(nèi)建的防御機(jī)制之一,在生物的正常發(fā)育及疾病抵御中起到重要的作用。凋亡過程與通路的異常,會(huì)導(dǎo)致多種疾病,包括腫瘤。目前至少有十?dāng)?shù)種檢測(cè)細(xì)胞凋亡的方法,從大框架上講,可以劃分為基于細(xì)胞形態(tài)、生物學(xué)功能和生化標(biāo)記三大類。那么細(xì)胞凋亡檢測(cè)基于形態(tài)學(xué)的方法是怎么操作的呢?1、電子顯微鏡檢查“凋亡”是一個(gè)細(xì)胞形態(tài)學(xué)概念。因此,鑒定凋亡的金指標(biāo),往往是基于形態(tài)學(xué)的。凋亡和另外一種主要的細(xì)胞死亡類型“壞死”有著顯著的亞細(xì)胞形態(tài)差異。簡而言之,在透射電鏡下,凋亡...
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在制藥行業(yè),細(xì)胞培養(yǎng)已成為抗體生產(chǎn)的重要組成部分。細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)已被用于生產(chǎn)針對(duì)輪狀病毒、脊髓灰質(zhì)炎、天花、肝炎、風(fēng)疹和水痘的抗體?;诩?xì)胞的流感抗體也已獲準(zhǔn)在美國和許多歐洲國家使用。那么細(xì)胞培養(yǎng)的前景如何?3D細(xì)胞培養(yǎng)出于多種原因,對(duì)2D細(xì)胞培養(yǎng)的需求正在增加。2D細(xì)胞培養(yǎng)方法包括在平面上將細(xì)胞培養(yǎng)成2D單層。二維貼壁細(xì)胞培養(yǎng)從根本上限制了細(xì)胞的產(chǎn)生。研究人員提出了3D細(xì)胞培養(yǎng)來解決這些問題。這些培養(yǎng)物已被證明在一些基本生物學(xué)機(jī)制的研究中是有效的,例如細(xì)胞數(shù)量監(jiān)測(cè)、細(xì)胞活力、...
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要了解細(xì)胞凋亡檢測(cè)方法,首先要了解細(xì)胞凋亡的形態(tài)學(xué)變化,形態(tài)學(xué)觀察表明細(xì)胞凋亡的變化是多階段的。細(xì)胞凋亡往往涉及多個(gè)細(xì)胞,甚至少數(shù)細(xì)胞也異步發(fā)生。首先細(xì)胞體積縮小,連接消失,與周圍細(xì)胞分離,然后細(xì)胞質(zhì)密度增加,隨后會(huì)發(fā)生一系列變化:線粒體膜電位消失;滲透率變化;將細(xì)胞c釋放到細(xì)胞質(zhì)中;核質(zhì)濃度、核膜和核仁碎裂;DNA被降解成180bp-200bp左右的片段,在細(xì)胞膜內(nèi)形成囊泡;絲氨酸膜表面轉(zhuǎn)向磷脂膜內(nèi)側(cè);細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)仍然完好無損??梢詫⒌蛲黾?xì)胞的殘骸分割包裹成若干個(gè)凋亡小體而不...
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作為生命科學(xué)領(lǐng)域的一項(xiàng)長期技術(shù),二維細(xì)胞培養(yǎng)使人類能夠在體外研究細(xì)胞的生理和病理。然而,隨著對(duì)細(xì)胞微環(huán)境概念的逐漸了解,科學(xué)家發(fā)現(xiàn)二維培養(yǎng)細(xì)胞的生理狀態(tài)和活性與體內(nèi)細(xì)胞并不*一致,結(jié)果往往與動(dòng)物實(shí)驗(yàn)和臨床結(jié)果不一致。實(shí)驗(yàn)。因此,在過去的十年里,科學(xué)家們一直致力于開發(fā)各種3D細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù),為細(xì)胞提供更類似于體內(nèi)環(huán)境的培養(yǎng)環(huán)境。研究人員逐漸意識(shí)到,為了在體外實(shí)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)和生理功能,3D細(xì)胞培養(yǎng)需要能夠模擬體內(nèi)環(huán)境的關(guān)鍵特征,包括細(xì)胞、細(xì)胞和細(xì)胞外基質(zhì)之間的相互作用,以及細(xì)...
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耐藥細(xì)胞株在長期保存和傳代過程中受到各種不穩(wěn)定因素的影響,例如,細(xì)胞遺傳污染和基因變異。因此,經(jīng)過一段時(shí)間后,細(xì)胞的遺傳物質(zhì)可能發(fā)生變化,導(dǎo)致其生物學(xué)特性發(fā)生變化,從而降低動(dòng)物模型的一致性和可比性。因此,為了保證動(dòng)物模型的穩(wěn)定性,必須對(duì)細(xì)胞株的質(zhì)量進(jìn)行監(jiān)測(cè)。那么你對(duì)它的培養(yǎng)方法了解多少?所有轉(zhuǎn)染腫瘤和病毒的細(xì)胞都被認(rèn)為具有潛在的生物危害,必須在二級(jí)生物安全平臺(tái)上操作,請(qǐng)注意防護(hù)。所有與該單元接觸的廢液和容器只能在高壓滅菌后丟棄。收到耐藥細(xì)胞株后,用倒置透鏡觀察整個(gè)細(xì)胞的生長情...
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胎牛血清FBS是一種性能強(qiáng)的血清產(chǎn)品,適用于精細(xì)細(xì)胞系的培養(yǎng),使用3次0.1μM過濾方法和40多項(xiàng)質(zhì)量控制測(cè)試。經(jīng)細(xì)胞培養(yǎng)試驗(yàn),該產(chǎn)品可用于腫瘤細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、雜交瘤、內(nèi)皮細(xì)胞等。經(jīng)過多道分離純化過濾工藝,質(zhì)地純凈,內(nèi)毒素等免疫原性蛋白含量極低,適用于各種細(xì)胞的取樣培養(yǎng),尤其是干細(xì)胞、原代細(xì)胞和其他血清依賴性高的細(xì)胞(如胚胎干細(xì)胞、骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞和星形膠質(zhì)細(xì)胞),以及其他高要求的實(shí)驗(yàn)研究對(duì)于血清質(zhì)量。胎牛血清FBS解凍要求:1、請(qǐng)?jiān)?℃~8℃的環(huán)境中解凍,不宜在較高溫度解凍...
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