產(chǎn)品展示
當(dāng)前位置:首頁產(chǎn)品展示技術(shù)服務(wù)細胞生物學(xué)實驗細胞凋亡檢測
產(chǎn)品簡介:細胞發(fā)生凋亡時,不同區(qū)域內(nèi)(如細胞膜、細胞漿、線粒體、細胞核等)會發(fā)生不同的生理生化改變。因此,針對不同區(qū)域的細胞凋亡檢測要采用不同的方法。
產(chǎn)品型號:
更新時間:2024-07-18
廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家
訪 問 量 :1459
021-51216810
產(chǎn)品分類
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RELATED ARTICLES一、細胞凋亡檢測介紹
人體內(nèi)的細胞注定是要死亡的,有些死亡是生理性的,有些死亡則是病理性的,有關(guān)細胞死亡過程的研究,已成為生物學(xué)、醫(yī)學(xué)研究的一個熱點。已知的細胞死亡方式起碼有兩種,即細胞壞死與細胞凋亡(apoptosis)。細胞壞死是早已被認識到的一種細胞死亡方式,而細胞凋亡則是逐漸被認識的一種細胞死亡方式。
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細胞凋亡是細胞的一種基本生物學(xué)現(xiàn)象,在多細胞生物去除不需要的或異常的細胞中起著必要的作用。它在生物體的進化、內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定以及多個系統(tǒng)的發(fā)育中起著重要的作用。細胞凋亡不僅是一種特殊的細胞死亡類型,而且具有重要的生物學(xué)意義及復(fù)雜的分子生物學(xué)機制。凋亡是多基因嚴格控制的過程,這些基因在種屬之間非常保守,如Bcl-2家族、caspase家族、癌基因如C-myc、抑癌基因P53等。而凋亡過程的紊亂可能與許多疾病的發(fā)生有直接或間接的關(guān)系。如腫瘤、自身免疫性疾病等,能夠誘發(fā)細胞凋亡的因素很多,如射線、藥物等。
二、檢測方法
細胞發(fā)生凋亡時,不同區(qū)域內(nèi)(如細胞膜、細胞漿、線粒體、細胞核等)會發(fā)生不同的生理生化改變。因此,針對不同區(qū)域的細胞凋亡檢測要采用不同的方法。
1)Annexin V 凋亡檢測
原理:Annexin Ⅴ是一種分子量為35-36kD的Ca依賴性磷脂結(jié)合蛋白,正常細胞中,磷脂酰絲氨酸(phosphatidylserine, PS)只分布在細胞膜脂質(zhì)雙層的內(nèi)側(cè),細胞發(fā)生凋亡早期,膜磷脂酰絲氨酸(PS)由脂膜內(nèi)側(cè)翻向外側(cè)。Annexin V作為一種磷脂結(jié)合蛋白,與PS有高度親和力,它通過細胞外側(cè)暴露的磷脂酰絲氨酸與凋亡早期細胞的胞膜結(jié)合。因此Annexin V是檢測細胞早期凋亡的靈敏指標(biāo)。該方法通常結(jié)合流式細胞術(shù)一起使用。
2)線粒體膜電位分析(JC-1)
JC-1是一種廣泛用于檢測線粒體膜電位的理想熒光探針。可以檢測細胞、組織或純化的線粒體膜電位,線粒體膜電位的下降是細胞凋亡早期的一個標(biāo)志性事件。
原理:在線粒體膜電位較高時,JC-1聚集在線粒體的基質(zhì)(matrix)中,形成聚合物(J-aggregates),可以產(chǎn)生紅色熒光(Ex/Em = 585/590);在線粒體膜電位較低時,JC-1不能聚集在線粒體的基質(zhì)中,此時JC-1為單體(monomer),可以產(chǎn)生綠色熒光(Ex/Em = 510/527 nm)。這樣就可以非常方便地通過熒光顏色的轉(zhuǎn)變來檢測線粒體膜電位的變化。
3)Caspase活性檢測
Caspase半胱氨酸蛋白酶家族引發(fā)的級聯(lián)反應(yīng)是細胞凋亡過程的中心環(huán)節(jié),其激活主要包括線粒體依賴途徑和死亡受體介導(dǎo)的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑。
原理:激活后的下游 Caspase,通過切割特異性底物,導(dǎo)致細胞凋亡。Caspase的活化是導(dǎo)致細胞凋亡的中心環(huán)節(jié),細胞凋亡功能的抑制將導(dǎo)致腫瘤的發(fā)生及免疫功能的異常,而細胞凋亡功能亢進與組織損傷和器官功能衰竭的發(fā)病密切相關(guān)。
4)TUNEL凋亡檢測
細胞凋亡中, 染色體DNA雙鏈斷裂或單鏈斷裂而產(chǎn)生大量的粘性3'-OH末端,可在脫氧核糖核苷酸末端轉(zhuǎn)移酶(TdT)的作用下,將脫氧尿苷三磷酸核苷酸(dUTP)和熒光素形成的衍生物標(biāo)記到DNA的3'-末端,從而可進行凋亡細胞的檢測,稱為TUNEL法。由于正常的或正在增殖的細胞幾乎沒有DNA的斷裂,因而沒有3'-OH形成,很少能夠被染色。由此,TUNEL是檢測DNA 片段化(細胞凋亡)的常用方法。
細胞凋亡是生命的基本現(xiàn)象,是維持體內(nèi)細胞數(shù)量動態(tài)平衡的基本措施。在胚胎發(fā)育階段通過細胞凋亡清除多余的和已完成使命的細胞,保證了胚胎的正常發(fā)育;在成年階段通過細胞凋亡清除衰老和病變的細胞,保證了機體的健康。和細胞增殖一樣細胞凋亡也是受基因調(diào)控的精確過程。
三、公司介紹
上海昆盟生物科技有限公司 (Coweldgen Scientific Co.,LTD) 是一家專注于生命科學(xué)領(lǐng)域提供相關(guān)試劑產(chǎn)品和服務(wù)的生物高科技企業(yè),坐落于上海聚科生物產(chǎn)業(yè)園。公司提供種類齊全的細胞系和多種原代細胞、質(zhì)量穩(wěn)定的細胞培養(yǎng)試劑產(chǎn)品、成熟高效的技術(shù)服務(wù)。本著“守正創(chuàng)新,科學(xué)嚴謹"的理念,我們以高標(biāo)準(zhǔn)塑造行業(yè)品牌,以全新視野構(gòu)建現(xiàn)代企業(yè),勇于探索和創(chuàng)新。公司業(yè)務(wù)范圍涉及全國各省市自治區(qū),與國內(nèi)多家醫(yī)院、高校、科研院所、生物科技公司建立了良好的合作關(guān)系,贏得了良好的市場聲譽和廣泛的認可,我們保證將繼續(xù)為廣大科研用戶提供專業(yè)、高效、優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品及服務(wù)!
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